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熱門檢測 | 氨基酸/脂肪酸/有機酸組分
動/植物理化檢測

在動植物理化檢測中,氨基酸組分、脂肪酸組分和有機酸組分的分析是重要的組成部分,這些分析對于理解生物體的營養組成、代謝途徑、食品質量控制以及生物標志物的研究都至關重要。

氨基酸組分

氨基酸是構成蛋白質的基本單元,不同種類和比例的氨基酸決定了蛋白質的特性和功能。在動植物檢測中,氨基酸組分分析可以用來評估食物的營養價值(如評價蛋白質的完整性)、監測飼料的質量、研究生物體內蛋白質代謝情況以及在醫藥領域鑒定活性成分等。常用的分析方法包括高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)和液相色譜-質譜聯用(LC-MS)等。


指標

方法

標準

樣品要求

用量/g

水解氨基酸組分

丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、纈氨酸、賴氨酸

高效液相色譜法

付迪,沈艷紅,宛燕飛,張力,徐志珍,張文清,夏瑋.OPA-FMOC在線柱前衍生化HPLC法測定甘露聚糖肽中氨基酸組成及含量

鮮樣/烘干樣

0.5

液相色譜串聯質譜法

趙文琦,夏菲,第五文博等.5種高山蔬菜的氨基酸含量分析及營養評價

游離氨基酸組分

丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、賴氨酸、牛磺酸

高效液相色譜法

衛陽飛,宋海,岳國仁,張宏曦,李彩霞.6種葡萄籽中水解氨基酸和游離氨基酸含量測定及比較[J].食品與機械,2018,34(09):77-82.

液相色譜串聯質譜法

趙文琦,夏菲,第五文博等.5種高山蔬菜的氨基酸含量分析及營養評價


脂肪酸組分

脂肪酸是構成脂質的重要成分,包括飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸等,它們對生物體的能量儲存、細胞膜結構和信號傳導等有重要作用。在動植物檢測中,分析脂肪酸組分有助于了解食物的營養價值(如區分有益心臟健康的不飽和脂肪酸與可能增加心血管疾病風險的飽和脂肪酸)、評估油料作物的質量、研究動物脂肪沉積規律以及在醫學上作為某些疾病的生物標志物等。常用的分析技術有氣相色譜法(GC)GC-MS


指標

方法

標準

樣品要求

用量/g

酪酸、羊油酸、羊脂酸、羊蠟酸、十一酸、月桂酸、椰油酸、肉豆蔻酸、肉豆蔻油酸、十五烷酸、十五烯酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、十七碳酸、十七烯酸、硬脂酸、反式油酸、油酸、反亞油酸、亞油酸、花生酸、γ-亞麻酸、花生油酸、a-亞麻酸、二十一碳酸、11,14-二十碳二烯酸、山崳酸、二十碳三烯酸(EETS)、芥酸、順11,14,17-二十碳三烯酸、花生四烯酸甲酯、二十三碳酸、順13,16-二十二碳二烯酸、木蠟酸、二十碳五烯酸(EPA)、順-15-二十四碳一烯酸(神經酸)、二十二碳六烯酸(DHA)

氣相色譜法

GB 5009.168-2016 食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定

鮮樣/烘干樣

2


有機酸組分

有機酸廣泛存在于自然界中,包括蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、乙酸等,它們在生物體內參與能量代謝、物質代謝調節以及作為信號分子等多種生理過程。在動植物檢測中,分析有機酸組分有助于評估食品的成熟度和新鮮度(例如,水果中的有機酸含量隨成熟度變化)、監測發酵過程(如乳制品和酒精飲料中的有機酸)、診斷植物病害(某些病害會導致特定有機酸含量異常)以及環境監測等。常見的分析手段也是HPLCGC-MS,根據有機酸的性質選擇合適的分析方法。


指標

方法

標準

樣品要求

用量/g

大分子有機酸組分

酒石酸、乳酸、蘋果酸、檸檬酸、丁二酸、富馬酸、己二酸等

高效液相色譜法

GB 5009.157-2016 食品安全國家標準 食品中有機酸的測定

鮮樣

2

液相色譜串聯質譜法

GB/T 40179-2021 植物中有機酸的測定 液相色譜-質譜/質譜法

小分子有機酸組分

乳酸、乙酸、丙酸、丁酸

高效液相色譜法

白杰,李德芳,陳安國,李建軍,黃思齊,唐慧娟.HPLC 法測定紅麻青貯飼料中的有機酸

5


技術說明

高效液相色譜法(HPLC

原理:HPLC是一種在高壓下操作的液相色譜技術,它利用泵將含有樣品的流動相(通常是溶劑)以高速通過填充有固體吸附劑的色譜柱。由于樣品中各組分與固定相之間相互作用力的差異,使得它們在柱內以不同的速度移動,從而實現分離。


應用:HPLC非常適合于分離和分析不易揮發、熱敏感或者相對分子質量較大的化合物,如多肽、蛋白質、核酸、多糖、藥物、有機污染物等。


特點:具有高分辨率、高靈敏度、快速分析等優點,是復雜混合物分析的有力工具。


氣相色譜法(GC

原理:GC是基于樣品組分在氣體作為流動相的情況下,經過加熱轉化為蒸汽狀態后,在固定相(涂覆在固體支持體上的涂層)上進行分配平衡,由于不同組分分配系數的差異實現分離的技術。


應用:主要用于分析小分子、易揮發、熱穩定的化合物,如輕烴、環境污染物、溶劑殘留、農藥、脂肪酸等。


特點:分離效率高、分析速度快、靈敏度高,是揮發性有機物分析的首選方法。


液相色譜質譜聯用(LC-MS

原理:LC-MS結合了液相色譜的高效分離能力和質譜的高度選擇性和高靈敏度的定性能力。樣品先通過液相色譜進行分離,隨后進入質譜儀進行離子化和質量分析,從而實現對復雜混合物中各組分的定性定量分析。


液相色譜質譜聯用技術(LC-MS)結合了液相色譜(HPLC)的高分離能力和質譜(MS)的高選擇性、高靈敏度、分子量及結構信息的優勢。相比單獨使用HPLCGCLC-MS具有以下顯著優勢:


分析范圍廣:LC-MS可以檢測幾乎所有類型的化合物,無論是揮發性還是非揮發性,小分子還是大分子,甚至蛋白質和多肽等生物大分子。


分離能力強:即使在色譜上未完全分離的混合物,通過LC-MS的特征離子質量色譜圖也能分別給出它們各自的色譜圖,進行定性定量分析。


定性分析結果可靠:LC-MS可以同時給出每一個組分的分子量和豐富的結構信息,提高了定性分析的準確性。


兼容性好:LC-MS克服了傳統HPLCMS之間的兼容性問題,使得液相色譜與質譜聯用成為可能,無需將樣品轉化為氣態即可直接進行分析。


操作簡便:現代LC-MS設備通常具有自動化程度高、操作簡便的特點,減少了人工誤差,提高了分析效率。


應用廣泛:LC-MS在藥物分析、食品安全檢測、環境監測、臨床診斷等多個領域都有著廣泛的應用。


樣本采集

1. 確定采樣目的和對象

在開始采集之前,明確你的研究目的(如物種多樣性調查、遺傳分析、污染監測等)和所需采集的植物部位(如葉片、根、花、果實、枝條等)。


2. 選擇采樣地點

根據研究需求選擇具有代表性的采樣地點。考慮地理、生態環境、植被類型等因素,確保樣本能夠反映目標區域的特點。


3. 采樣時間

有些研究對采樣時間有特定要求,如開花期、結果期或特定季節。確保在最佳時期采集,以獲取最符合研究目的的樣本。


4. 采樣工具準備

準備適當的工具,如剪刀、鑷子、標簽、記錄本、塑料袋或紙袋(用于保存樣品)、GPS定位器(記錄采樣點位置)等。


5. 采樣方法

隨機采樣:適用于需要統計總體特征的研究,通過隨機選擇采樣點來保證樣本的代表性。

系統采樣:在已定義的路徑或網格上定期采樣,適用于環境梯度變化的研究。

判別采樣:根據特定標準(如植物大小、健康狀況)選擇樣本,適用于特定問題的研究。

全數采樣:在小范圍內或個體數量有限時,可能需要采集所有個體。


6. 樣品處理與記錄

標記與記錄:每份樣品都應該立即做好標記,記錄采集時間、地點、環境條件、采集者信息等。

保存與運輸:根據樣品類型采取適當措施進行干燥、冷藏或固定,以防止腐敗或變質。確保樣品在運輸過程中保持其原始狀態。

倫理與法規:遵守當地的法律法規和道德規范,尤其是對于受保護的植物物種,需獲得必要的采集許可。


7. 后續處理

回到實驗室后,根據研究目的對樣品進行進一步處理,如清洗、分選、干燥、制片、DNA提取等。


點擊進入【學院】查看動/植物樣品的采集制備與保存運輸。


樣本要求

采集的樣品,均應在短時間內進行分析檢測,如不能及時分析檢測的則需要進行處理和保存,一般應遵循的原則是:環境干燥、溫度較低、避免光照、密封保存。


鮮樣:取樣后立即放入用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管(提前進行編號)并放入液氮速凍,-80℃超低溫冰箱保存,足量干冰郵寄運輸,避免反復凍融。

烘干樣:取樣后用柔軟濕布擦凈,不應用水沖洗。盡快晾干并將樣品置于105 ℃的烘箱中烘 15min以終止樣品中酶的活動。經過殺青之后,應立即降低烘箱的溫度,維持在7080℃,直到烘至恒重。若測定樣品中金屬元素的含量,應注意金屬器械的污染問題,以防干擾。


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